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產(chǎn)地 | 國產(chǎn),進(jìn)口 |
品牌 | ATCC,sciencell |
貨號 | HZX-50385 |
保存條件 | -20℃ |
英文名稱 | PK-15 |
保質(zhì)期 | 10年個月 |
豬腎細(xì)胞來源于ATCC原代細(xì)胞,ATCC傳代細(xì)胞,sciencell細(xì)胞
原代凍存或復(fù)蘇培養(yǎng),復(fù)蘇時間1-2周,保證細(xì)胞純度在98%以上,同時也需經(jīng)過微生物檢測,保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細(xì)菌.
細(xì)胞名稱 :豬腎細(xì)胞
簡稱:PK-15
培養(yǎng)條件:DMEM +10% FBS
形 態(tài):貼壁;上皮細(xì)胞樣
背 景:PK-15細(xì)胞建系于1955(Stice,E)。是PK-1a細(xì)胞的克隆系。該細(xì)胞系可用于多種病毒的增值及特性研究。另外,電鏡觀察發(fā)現(xiàn),PK-15細(xì)胞內(nèi)有C-型病毒顆粒存在,是研究C-型病毒的材料。
細(xì)胞數(shù): 1×106cells
規(guī)格: 1ml/T25
運(yùn)輸保存:采用干冰保存運(yùn)輸
細(xì)胞用途:僅供科研使用
豬腎細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程僅供參考
準(zhǔn)備好培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件及凍存液。
細(xì)胞處理
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,*的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。
豬腎細(xì)胞購買細(xì)胞注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件.
6. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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