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產地 | 國內 |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HZW0825 |
用途 | 僅限科研 |
包裝規格 | 48T/盒 |
純度 | 詳詢客服% |
CAS編號 | |
是否進口 |
產品名稱:牛源性成分(Bovine)核酸檢測試劑盒(PCR法)
包裝:48T
分類:pcr-熒光試劑盒
用途:本產品僅供科研與實驗使用,不用于臨床診斷等
目的:本試劑盒適用于檢測疑似感染者或發病動物等組織、體液或淋巴結等標本中禽流感病毒rna,用于禽流感病毒感染的輔助診斷,其檢測結果僅供參考。
牛源性成分(Bovine)核酸檢測試劑盒(PCR法) PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。
牛源性成分(Bovine)核酸檢測試劑盒(PCR法)
在PCR 管中加入下列成分:
成份 |
樣品 |
陽性對照 |
陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer, 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 2 uL |
EMCV 陽性對照 | 無 | 2 uL | 無 |
補超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機,按下面參數進行 RT-PCR。
牛源性成分(Bovine)核酸檢測試劑盒(PCR法) 電泳檢測RT-PCR 產物。預期的PCR 產物長度為 286 bp。
牛源性成分(Bovine)核酸檢測試劑盒(PCR法) 產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
需要注意*:
PCR反應液請在冰中配制,然后置于PCR反應儀上進行PCR反應。這種冷啟動法(Cool Start Method)與熱啟動法(Hot Start Method)相結合,更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應,增強PCR擴增的特異性,能得到良好的PCR結果。
PCR的反應條件:
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環次數
根據模板DNA的量以及擴增片段的大小,設定25~30個循環。
如果循環次數太少,擴增量不足;如果循環次數太多,則會出現Smear。
實驗操作
1.模板制備(樣本制備區)
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產品,具體過程詳見產品說明書。
2.添加模板(模板添加區,放置于冰盒上進行)
剪下所需測試數的已含有反應液的PCR管,放置在室溫待解凍后,離心30秒后揭開封口膜,向每管反應液中分別加入5μL模板,順序為NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后,渦旋混勻30s,離心1min,立即進行PCR擴增反應。
3. 擴增反應(擴增及產物分析區)
使用熒光定量PCR儀,熒光基團選擇FAM,淬滅基團選擇TAMRA。