【產品名稱】

商品名稱：禽偏肺病毒（aMPV）檢測試劑盒(熒光-PCR法)

【包裝規格】50 份/盒

【預期用途】

本試劑盒適用于檢測的血清或血漿、疑似污染 REV 的活病

毒疫苗等標本中禽網狀內皮組織增殖病病毒 RNA，適用于禽網狀內皮組織增殖病病

毒感染的輔助診斷。其檢測結果僅供參考。

禽偏肺病毒（aMPV）檢測試劑盒(熒光-PCR法)【檢驗原理】

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融次數不超過 5 次，有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】

水樣便取 0.5~1mL；疑似污染的食物取 1g

【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。

【使用方法】

1. 樣品處理（樣本處理區）

1.1 樣本前處理

水樣便 13000rpm 離心 2min，去盡上清；疑似污染的食物用手術剪剪碎混勻后取0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨，待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；疑似污染的水直接取 100μL

1.2 DNA 提取

1) DNA 的提取也可以采用DNA 提取試劑盒（離心柱提取法），請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

本試劑盒用一對禽網狀內皮組織增殖病病毒特異性引物，結合一條特異性熒光

探針，用一步法熒光 RT-PCR 技術對禽網狀內皮組織增殖病病毒 RNA 進行體外擴

增檢測，用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

【試劑組成】

名 稱 規 格

酶液 50μl×1 管

REV 反應液 1.0ml×1 管

REV 陽性質控品 50μl ×1 管

陰性質控品 250μl ×1 管

說明：不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

禽偏肺病毒（aMPV）檢測試劑盒(熒光-PCR法) 結果分析條件設定

設置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結果分析，當曲線出現整體傾斜時，根據分析后圖像調節Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內調節)、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節)，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照)，重新分析結果。

1.2 結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數增長曲線；

可疑：檢測通道 35 值≤38，建議重復檢測，如果檢測通道仍為 35 值≤38， 且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性，否則為陰性；

陰性：樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

2. 質控標準

陰性質控品：Ct 值>38 或無 Ct 值；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

反應五要素：

 

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數 個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 

大鼠組織蛋白酶K(CTSK)ELISA試劑盒 Rat CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit

大鼠組織蛋白酶L(CTSL)ELISA試劑盒 Rat CTSL (Cathepsin L) ELISA Kit

大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 Rat TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit

大鼠組織纖溶酶原激活物(tPA)ELISA試劑盒 Rat tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit

大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒 Rat TF (Tissue Factor) ELISA Kit

大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 Rat TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) ELISA Kit

大鼠組織轉谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA試劑盒 Rat TGM2 (Transglutaminase 2, Tissue) ELISA Kit

大鼠胰島素自身抗體（IAA）ELISA試劑盒 Rat IAA (Insulin Autoantibodies) ELISA Kit

大鼠利鈉肽受體1(NPR1)ELISA試劑盒 Rat(NPR1)ELISA Kit

大鼠利鈉肽受體1(NPR2)ELISA試劑盒 Rat(NPR2)ELISA Kit

大鼠利鈉肽受體1(NPR3)ELISA試劑盒 Rat(NPR3 )ELISA Kit

大鼠細胞色素P450 3A4（CYP3A4）ELISA試劑盒 Rat(CYP3A4 )ELISA Kit

大鼠I型膠原氨基端肽 CTX-1）ELISA試劑盒 Rat（CTX-1）ELISA Kit

大鼠內源性糖皮質激素（GC）ELISA試劑盒 Rat（GC）ELISA Kit

大鼠絲氨酸棕櫚酰轉移酶長鏈堿性亞基2(SPTLC2)ELISA試劑盒 Rat（SPTLC2）ELISA Kit

大鼠絲氨酸棕櫚酰轉移酶長鏈堿性亞基1(SPTLC1)ELISA試劑盒 Rat（SPTLC1）ELISA Kit

大鼠絲氨酸棕櫚酰轉移酶長鏈堿性亞基3(SPTLC3)ELISA試劑盒 Rat（SPTLC3）ELISA Kit

大鼠三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒 Rat（IP3）ELISA Kit

大鼠雌激素（E）ELISA試劑盒 Rat（E）ELISA Kit

大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat（CTX-Ⅰ）ELISA Kit

大鼠類胰蛋白酶（TPS）ELISA試劑盒（活性）

大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 Rat（TPS）ELISA Kit