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產地 | 國產/進口 |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HSP4512 |
用途 | 僅限科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒
產品介紹及用途:
產品名稱:Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒
產品規格:50T/ 盒
Benzonase核酸酶,是一種核酸內切酶,可將核酸降解成2~5個堿基的5‘單磷酸核苷酸,因其能高效降解任何形式(雙鏈,單鏈,線狀,環狀)的DNA和RNA而沒有蛋白裂解活性,又被稱為“全能核酸酶”。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白樣品粘度,去除蛋白樣品中核酸的污染,且無蛋白酶活性殘留,核酸酶活性達1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的同時, 也具有多種其他用途,如:減少了樣品處理時間,增加了蛋白產量,離心時時沉淀和上清分離的更徹底,更便于溶液的離心(尤其是超濾);提高色譜純化的效率等。
Benzonase核酸酶包括四種,分別為不含任何標簽的Benzonase核酸酶(科研級別)、無內毒素Benzonase核酸酶、Strep tagII Benzonase核酸酶(科研級別)和無內毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶,可適應不同下游用途的需求。其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通過Strep Tactin XT Resin高效去除,而無內毒素的兩種Benzonase核酸酶,內毒素含量<40EU/mL(按照單位換算量計算為,每1000U中含有的內毒素<0.15EU),可適用于藥用級別的研發和生產。另外,核酸酶殘留可通過我公司開發的基于 熒光探針的Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒進行評測,15min即可完成檢測,*可檢測到2ng/ml的核酸酶殘留。
單位定義
37℃,pH 8.0反應條件下,在30分鐘內使△A260 值降低1.0(相當于完全消化37 μg DNA )的酶量定義為一個活性單位。
注意:含大量蛋白、細胞壁、其它鹽分的粗制品,對該酶活性有部分抑制作用,使用時需要增加酶的用量。
應用
蛋白提取時去除核酸污染:在重組蛋白純化或組織細胞樣品蛋白提取時,Benzonase核酸酶可有效降低樣品粘度,利于下游操作
與細胞或細菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白質產量
減少存放的外周血單細胞(PBMC)的結塊現象
降解核酸,利于不可溶性蛋白復性前高質量包涵體制備
有效去除帶負電荷的核酸對雙向SDS-PAGE蛋白樣品的影響,改善蛋白質的分離效果,增強2-DE分辨率
疫苗和病毒樣品制備中DNA污染的去除
儲存
置于-20°C,可保存2年。
超強兼容性
全能核酸酶在非常廣泛的條件下,都能保持很高的穩定性和消化核酸的活性,這使其能夠與多種細胞裂解液,如RIPA,或含有多種離子和非離子型去污劑、還原劑的蛋白提取試劑等兼容。例如:>100mM的鹽酸胍會完全抑制Benzonase活性,1mM的EDTA會部分抑制Benzonase活性,5mM的EDTA會使活性喪失90%,1mM的PMSF則不會抑制核酸酶活性。 濃度<0.4%的Triton® X-100對核酸酶活性幾乎無影響,<0.4%的脫氧膽酸鈉使核酸酶可保持70%的活性,超過該臨界值之后核酸酶活性會急劇降低,1%的濃度會使活性喪失70%;0.05%的SDS對核酸酶活性幾乎無影響,而SDS濃度在0.1%-1%之間時,核酸酶在變性后活性會急劇降低,可通過增加核酸酶的量使活性得到補償。另外,核酸酶可耐受6M尿素,當尿素達到7M時,核酸酶在變性后活性會急劇降低,亦可通過增加核酸酶的量使活性得到補償。
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。