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上海滬崢生物科技有限公司
產品展廳
牛病毒性腹瀉病毒2型PCR檢測試劑盒
  • 品牌:上海滬崢
  • 產地:國內
  • 貨號:HZT2345
  • 價格: ¥2800/千克
  • 發布日期: 2021-03-16
  • 更新日期: 2025-04-18
產品詳請
產地 國內
品牌 上海滬崢
貨號 HZT2345
用途 僅科研
包裝規格 50T/盒
純度 詳詢客服%
CAS編號
是否進口






產品特點:1、靈敏度高,抗污染能力強,定量準確,重復性好;2、樣本處理與PCR擴增在同一個PCR反應管中即可完成;3、無需加熱

產品說明:1.高便捷性。 2.靈敏度高。 3.特異性強。 4.精密性好。 5.結果準確可靠。 6.嚴格的質量標準。

結構及組成:聚合酶鏈式反應液(PCR反應液)、RNA提取液、DEPC水、內標模板、陰性質控品、陽性質控品。(具體內容詳見說明書)


試劑盒準備物品:
清理液(A)                                    毫升
染色液(t B)                                  微升
稀釋液(C)                                    毫升
溶解液(tD)                                   毫升
產品說明書                                       1份
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

P CR實驗概述

 聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法,而且也是一個能對核酸分子進行定量的有力工具。隨著分子生物學技術研究的不斷進展,定量PCR技術取得了突飛猛進的發展,實時定量PCR (real-timequantitative PCR)技術便是一種具有意義的定量PCR技術。所謂實時定量PCR是指在PCR指數擴增期間通過連續監測熒光信號強弱的變化來即時測定特異性產物的量,并據此推斷目的基因的初始量。

PCR實驗原理介紹

TaqMan熒光探針

PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成同步。

牛病毒性腹瀉病毒2型PCR檢測試劑盒注意事項:

1.基礎程序。
2.擴增溫度和延伸溫度。
3.反應時間。
4.循環次數。
5.PCR 反應液的配制。
6.PCR技術的基本原理。
7.PCR的反應動力學。
8.PCR擴增產物。
9.PCR反應體系與反應條件。






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