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產(chǎn)品分類
聯(lián)系方式
  • 上海滬崢生物科技有限公司
  • 聯(lián)系人:李小姐
  • 電話:021-20421762
  • 傳真:021-68969289
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牛病毒性腹瀉病毒2型PCR檢測試劑盒
  • 品牌:上海滬崢
  • 產(chǎn)地:國內(nèi)
  • 貨號:HZT2345
  • 價格: ¥2800/千克
  • 發(fā)布日期: 2021-03-16
  • 更新日期: 2025-01-03
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 國內(nèi)
品牌 上海滬崢
貨號 HZT2345
用途 僅科研
包裝規(guī)格 50T/盒
純度 詳詢客服%






產(chǎn)品特點:1、靈敏度高,抗污染能力強,定量準確,重復(fù)性好;2、樣本處理與PCR擴增在同一個PCR反應(yīng)管中即可完成;3、無需加熱

產(chǎn)品說明:1.高便捷性。 2.靈敏度高。 3.特異性強。 4.精密性好。 5.結(jié)果準確可靠。 6.嚴格的質(zhì)量標準。

結(jié)構(gòu)及組成:聚合酶鏈式反應(yīng)液(PCR反應(yīng)液)、RNA提取液、DEPC水、內(nèi)標模板、陰性質(zhì)控品、陽性質(zhì)控品。(具體內(nèi)容詳見說明書)


試劑盒準備物品:
清理液(A)                                    毫升
染色液(t B)                                  微升
稀釋液(C)                                    毫升
溶解液(tD)                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                       1份
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

P CR實驗概述

 聚合酶鏈式反應(yīng)(polymerase chain reaction, PCR)自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法,而且也是一個能對核酸分子進行定量的有力工具。隨著分子生物學技術(shù)研究的不斷進展,定量PCR技術(shù)取得了突飛猛進的發(fā)展,實時定量PCR (real-timequantitative PCR)技術(shù)便是一種具有意義的定量PCR技術(shù)。所謂實時定量PCR是指在PCR指數(shù)擴增期間通過連續(xù)監(jiān)測熒光信號強弱的變化來即時測定特異性產(chǎn)物的量,并據(jù)此推斷目的基因的初始量。

PCR實驗原理介紹

TaqMan熒光探針

PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成同步。

牛病毒性腹瀉病毒2型PCR檢測試劑盒注意事項:

1.基礎(chǔ)程序。
2.擴增溫度和延伸溫度。
3.反應(yīng)時間。
4.循環(huán)次數(shù)。
5.PCR 反應(yīng)液的配制。
6.PCR技術(shù)的基本原理。
7.PCR的反應(yīng)動力學。
8.PCR擴增產(chǎn)物。
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。