人星狀病毒(HastV)試劑盒(熒光-PCR法)為上海滬崢PCR主要產(chǎn)品之一，產(chǎn)品優(yōu)勢(shì) 樣品種類(lèi)多，質(zhì)控嚴(yán)格，高特異性，供貨快，已被國(guó)內(nèi)外廣大科研工作者使用，被稱(chēng)謂：質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品
通用名稱(chēng)：人星狀病毒(HastV)試劑盒(熒光-PCR法)

規(guī)格：50T/盒

英文名稱(chēng)：HastV Detection Kit (Real-Time PCR Method)

自備試劑：樣品 RNA

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒對(duì)人星狀病毒(HastV)基因保守區(qū)設(shè)計(jì)特異性的引物和探針[1-3]，用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，從而達(dá)到快速檢測(cè)之目的。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃避光保存、運(yùn)輸、避免反復(fù)凍融，有效期12個(gè)月。

【適用儀器】

ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測(cè)儀。
【保存和運(yùn)輸】

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但不能超過(guò)6個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用0℃冰代。

結(jié)果判斷

陽(yáng)性：檢測(cè)通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線；

可疑：檢測(cè)通道 35值≤38，建議重復(fù)檢測(cè)，如果檢測(cè)通道仍為 35值≤38， 且曲線有明顯的增長(zhǎng)曲線，判定為陽(yáng)性，否則為陰性；

陰性：樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>38 或無(wú) Ct 值。

質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：Ct 值>38 或無(wú) Ct 值；

陽(yáng)性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

1. 即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供樣品RNA模板。

2. 引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化，靈敏性高。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 特異性高，引物是根據(jù)馬動(dòng)脈炎病毒高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針?lè)晒舛?RT-PCR 反應(yīng)。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研

7.．不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿混合使用，在有效期內(nèi)使用。

運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，2-8℃保存，保存期限為12個(gè)月。

人星狀病毒(HastV)試劑盒(熒光-PCR法)樣本提取操作

1. 取 200μL 處理好的樣本（不足 200μL，可以加入 PBS 緩沖液或者生理鹽水補(bǔ)足 200μL），加入 500μL

裂解液，振蕩 30 秒，室溫靜止 2 分鐘。注：針對(duì)   難裂解樣本，室溫靜置時(shí)間可延長(zhǎng)至5 分鐘。

2. 把上述混合液轉(zhuǎn)移到吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液體時(shí)盡量不要吸到懸浮雜質(zhì)，以免阻塞吸附膜），10000rpm 離心 1 分鐘，棄去套管中液體。

3. 向吸附柱中加入 500μL 去蛋白漂洗液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。

4. 向吸附柱中加入 500μL 洗滌液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。

5. 向吸附柱中加入 500μL 洗滌液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。

6. 12000rpm 再次離心 2 分鐘。

7. 把吸附柱轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL 滅菌離心管中，向吸附柱中加入 50μL 洗脫液，并于室溫溫育 2 分鐘。

8.12000rpm 離心 1 分鐘，棄去吸附柱，1.5mL 滅菌離心管中液體即為 DNA/RNA 溶液。提取的 DNA/RNA

可直接用于各種下游應(yīng)用試驗(yàn)，如不立即使用，請(qǐng)于-80℃保存。

注意事項(xiàng)】

?所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；檢驗(yàn)過(guò)程中，參照《GB/T 27403 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測(cè)》的規(guī)定進(jìn)行。

?試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，混勻并短暫離心；

?反應(yīng)液應(yīng)避光保存；

?反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

?使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專(zhuān)用工作服；

?樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；