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- 上海滬崢生物科技有限公司
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東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒
- 品牌:上海滬崢
- 產(chǎn)地:國內(nèi)
- 貨號:HZT2499
- 價格: ¥280/千克
- 發(fā)布日期: 2021-03-25
- 更新日期: 2024-12-27
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HZT2499 |
用途 | 僅限科研 |
包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
純度 | 詳詢客服% |
東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒
試劑盒準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒
1.基礎(chǔ)程序。
2.擴增溫度和延伸溫度。
3.反應時間。
4.循環(huán)次數(shù)。
5.PCR 反應液的配制。
6.PCR技術(shù)的基本原理。
7.PCR的反應動力學。
8.PCR擴增產(chǎn)物。
9.PCR反應體系與反應條件。
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